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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

兔退行性椎間盤髓核細胞

產(chǎn)品簡介:

兔退行性椎間盤髓核細胞公司正在出售的產(chǎn)品:小鼠外周血單個核細胞 兔脊髓神經(jīng)元細胞 FRMD3蛋白抗體 熒光素酶標(biāo)記的人單核細胞白血病;THP-1-Luc 鋅指蛋白136抗體 HEL 299 缺氧誘導(dǎo)蛋白HIG1抗體 MA-891 (小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:1119

更新時間:2024-11-05

產(chǎn)品特性Product characteristics

兔退行性椎間盤髓核細胞

兔退行性椎間盤髓核細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

椎間盤

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

梭形、多角形

YS-01X8441

細胞簡介:

兔退行性椎間盤髓核分離退行性椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,富于彈性的膠狀物質(zhì);周圍部的纖維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷。髓核,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散,位于椎間盤的中央,至成年時位置移至椎間盤的中后部;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的兔退行性椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔退行性椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每3-4天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):梭形、多角形

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔退行性椎間盤髓核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔退行性椎間盤髓核細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔退行性椎間盤髓核細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒

小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒

小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒

小鼠抗IVIgG抗體試劑盒

FSP-1抗體

富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體

EFNB2重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein

CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原

PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標(biāo)簽) Protein

CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原

CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白

EFNB2重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標(biāo)簽) Protein

小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA pcr檢測試劑盒

Human glucose 6 phosphate isomerase (GPI) ELISA Kit 人葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒

Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)pcr檢測試劑盒分裝

Humanacidicfibroblastgrowthfactor1,aFGF-1試劑盒人酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T

脂肪肝比色法定量試劑盒

MouseannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔退行性椎間盤髓核細胞大鼠促甲狀腺激素(TSH)試劑盒 ,英文名: TSH ELISA Kit

Mouse procollagen C N-terminal peptide (C I CP) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒

ELISA 小鼠皮質(zhì)酮(mouse Coicosterone) 分裝

CLIAKitforLH(Humanleoopichormone)ELISAKit

通用型HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitPF-4/CXCL4血小板因子4



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